بانک جزوات و مقالات تخصصی و کاربردی ترجمه ® ویژه دروس پزشکی ®

Thayer-Martin آگار یک محیط انتخابی است که برای جداسازی گنوکوک ها (Neisseria gonorrheae) از نمونه های حاوی فلور مخلوطی از باکتری ها و/یا قارچ ها استفاده می شود. نمونه ادراری تناسلی آگار اصلاح شده تایر مارتین (MTM) یک پایه آگار GC حاوی وانکومایسین، کولیستین، نیستاتین و تری متوپریم لاکتات (VCNT) است. جداسازی انتخابی نایسریا گونوره با سرکوب اکثر دیپلوکوک های گرم منفی، باسیل های گرم منفی، ارگانیسم های گرم مثبت و مخمر به دست می آید

محیط Thayer-Martin حاوی مواد ضد میکروبی است که مانع از رشد ارگانیسم‌هایی غیر از N. gonorrhoeae می‌شود.

وانکومایسین باکتری های گرم مثبت را مهار می کند
کولیستین باکتری های گرم منفی از جمله کامنسال نایسریا را مهار می کند.
تری متوپریم از تجمع گونه های پروتئوس جلوگیری می کند.
نیستاتین یک عامل ضد قارچ است

بیشتر سویه های نایسریا نیازمند رشد پیچیده ای هستند. گونوکوک ها قادر به رشد در آگار خون معمولی نیستند

تهیه تایر مارتین آگار اصلاح شده
تهیه پایه GC Agar
اجزای پایه متوسط ​​GC را به آب مقطر اضافه کنید و حجم را به 730.0 میلی لیتر برسانید. خوب مخلوط کنید. به آرامی حرارت دهید تا به جوش بیاید. اتوکلاو در دمای 121 درجه سانتیگراد به مدت 15 دقیقه. تا دمای 45-50 درجه سانتیگراد خنک شود.
تهیه محلول هموگلوبین
هموگلوبین را به آب مقطر اضافه کنید و حجم آن را به 250.0 میلی لیتر برسانید. کاملا مخلوط کنید. اتوکلاو در دمای 121 درجه سانتیگراد به مدت 15 دقیقه. تا دمای 45-50 درجه سانتیگراد خنک شود.
آماده سازی غنی سازی IsoVitaleX (10 میلی لیتر)
اجزاء را به آب مقطر اضافه کنید و حجم را به 10.0 میلی لیتر برسانید. کاملا مخلوط کنید. فیلتر استریل کنید.
تهیه محلول آنتی بیوتیک VCNT (10 میلی لیتر)
اجزاء را به آب مقطر اضافه کنید و حجم را به 10.0 میلی لیتر برسانید. کاملا مخلوط کنید. فیلتر استریل کنید.
آماده سازی محیط
به 730.0 میلی لیتر از پایه سرد شده و استریل GC آگار، 250.0 میلی لیتر محلول هموگلوبین استریل را به صورت آسپتیک اضافه کنید. 10.0 میلی لیتر IsoVitaleX غنی شده و 10.0 میلی لیتر محلول آنتی بیوتیک VCNT. کاملا مخلوط کنید و در ظروف پتری استریل بریزید یا در لوله های استریل پخش کنید

کشت و جداسازی

نمونه (مجرای ادراری یا اندوسرویکال) مستقیماً در پلیت های کشت تلقیح می شود (سواب هایی با شفت های پلاستیکی یا سیمی ، داکرون یا آلژینات کلسیم برای جمع آوری نمونه برای کشت گونوکوک استفاده می شود).
پلیت کشت تلقیح شده باید به سرعت در یک محیط غنی شده با CO2 (3٪ - 10٪) قرار داده شود و در دمای 35-37 درجه سانتیگراد انکوبه شود.
کلنی های کوچک مات، خاکستری مایل به سفید تا بی رنگ، برجسته، درخشان و صاف دیده می شود.
کنترل کیفیت
سویه N. meningitidis QC را به مدت 18-24 ساعت در MTM در دمای 35-37 درجه سانتی گراد با 5% CO2 (یا در شیشه شمع) انکوبه کنید.
MTM را برای مورفولوژی کلنی خاص مشاهده کنید.
به عنوان یک آزمایش استریل بودن محیط، یک پلیت  بدون تلقیح را به مدت 48 ساعت در دمای 35-37 درجه سانتیگراد با 5% CO2 (یا در یک شیشه شمع) انکوبه کنید

نتیجه و تفاسیر
N. meningitidis باید به صورت کلونی های بزرگ، گرد، صاف، محدب، بی رنگ تا خاکستری مات روی MTM بدون تغییر رنگ محیط ظاهر شود.