بانک جزوات و مقالات تخصصی و کاربردی ترجمه ® ویژه دروس پزشکی ®

روش

رنگ آمیزی گرم در ابتدا برای تعیین حضور نظم و مورفوتایپ های باکتریایی در انواع نمونه‌های بالینی مورد استفاده قرار می‌گیرد. نتایج کشت باکتریایی نیز باید با نتایج اسمیر گرم از نمونه بالینی اصلی مرتبط باشد. ارگانیسم‌هایی که در کشت موفق به رشد نمی‌شوند اما در رنگ‌آمیزی گرم دیده می‌شوند ممکن است گونه‌های باکتریایی سخت رشد (‏از جمله بی‌هوازی‌ها)‏را نشان دهند که نیاز به محیط‌های خاص و شرایط رشد دارند تا قابل دوام باشند. ​

الف. آماده سازی اسلاید

1. ملاحظات کلی

اسلایدهای شیشه ای مات شده را در ظرفی حاوی اتانول 95 درصد قرار دهید (محلول الکل را روزانه تغییر دهید).

انتهای مات شده را با اطلاعات برای شناسایی نمونه یا کشت برچسب بزنید. نمونه های بالینی باید در یک کابینت ایمنی زیستی، از جمله تهیه اسلایدهای رنگ آمیزی گرم، پردازش و نگهداری شوند. هنگام کار در کابینت BSL2، PPE باید استفاده شود، از جمله روپوش و دستکش، و کارکنان آزمایشگاه باید برای پیروی از سایر توصیه های BSL2 آموزش ببینند

2. برای اسمیر مستقیم، تک لایه ای از ارگانیسم ها را تهیه کنید که به اندازه کافی متراکم باشد تا تجسم آسان باشد اما به اندازه کافی پراکنده باشد تا ترتیبات مشخصه را نشان دهد به عنوان یک راهنما، چاپ روزنامه باید از طریق این اسمیر قابل‌مشاهده باشد.

1. مایعات بدن، مایع لاواژ برونکوآلوئولار (BAL) و CSF
2. 6 قطره از نمونه به اضافه 1 قطره فرمالین 37 درصد را در محفظه نمونه سیتوسپین قرار دهید

توجه: استفاده از سانتریفیوژ سیتوسل برای تغلیظ مایعات بدن، حساسیت رنگ آمیزی گرم را افزایش می‌دهد و زمان سانتریفیوژ استاندارد و آزمایش را برای نتایج سریع‌تر کاهش می‌دهد .

‏به عنوان یک جایگزین زمانی که نمونه چسبناک یا ابری است یا مقدار برای غلظت کافی نیست، از پیپت پاستور برای انتقال ۱ یا ۲ قطره از نمونه به طور مستقیم به اسلاید، پس از علامت‌گذاری محل با یک مداد مومی استفاده کنید. اجازه دهید قطره (‏ها)‏یک قطره بزرگ تشکیل دهند. مایع را پخش نکنید. به طور اختیاری، یک قطره دوم مایع را به همان ناحیه اضافه کنید تا غلظت مایع برای آزمایش افزایش یابد ‏.

ب. نمونه‌های ادرار

‏۱۰میکرولیتر ادرار بدون سانتریفیوژ و به خوبی مخلوط شده را روی یک اسلاید شیشه‌ای که با مداد مومی علامت‌گذاری شده بود قرار دهید تا محل قطره نمونه مشخص شود. یک اسلاید حلقه‌ای نیز ممکن است برای سهولت در پیدا کردن نمونه مورد استفاده قرار گیرد. ‏ بدون پخش شدن خشک کنید.

نمونه‌های گرفته‌شده بر روی سوآب

(‏۱)‏یک سوآب جداگانه برای آماده‌سازی اسمیر کافی درخواست کنید.

توجه: بسیاری از سیستم‌های کشت دو سوآب را در ظرف قرار می‌دهند و مشکلات با سوآب کافی برای هر آزمایش مورد درخواست را از بین می‌برند

(‏۲)‏سوآب را به آرامی در طول اسلاید لوله کنید تا از تخریب عناصر سلولی و اختلال در آرایش باکتری‌ها جلوگیری کنید. ​

(‏۳)‏متناوبا، وقتی تنها یک سوآب دریافت می‌شود، سوآب را در مقدار کمی از سالین یا محیط کشت، vortex قرار دهید. سواب را روی کناره لوله فشار دهید و از سواب برای تهیه اسمیر استفاده کنید از سوسپانسیون باقی مانده برای inoculate محیط کشت استفاده کنید.

نکته: هرگز لوله باز را با شدت مخلوط نکنید. از ایجاد آئروسل ها اجتناب کنید.

د. نمونه‌ها بر روی سوآب

سوآب، اگزودا، خلط و غیره

(‏۱)‏انتقال نمونه به اسلاید تمیز.

(‏a)‏نمونه‌های دریافت‌شده توسط آزمایشگاه در یک سرنگ با سوزن متصل شده هنوز باید به دلیل خطر قرار گرفتن در معرض اجسام تیز توسط کارکنان آزمایشگاه، رد شوند. پزشک باید فورا تماس بگیرد تا نمونه را به خاطر بیاورد و آن را به ظرف مناسب بفرستد. توجه: ایجاد سیاستی برای جمع‌آوری و انتقال مناسب نمونه‌های بالینی جمع‌آوری‌شده بر روی سوآب. پزشکان را آموزش دهید که سوزن باید از سرنگ برداشته شود و پوشش سرنگ باید قبل از انتقال ایمن شود تا از نشت جلوگیری شود.

(b) قسمت‌های چرکی یا خونی از چرک یا خلط را با چسب استریل، پیپت یا حلقه سیمی انتخاب کنید

(‏c)‏نمونه را در یک منطقه بزرگ از اسلاید گسترش دهید تا یک لایه نازک را تشکیل دهید.

(‏۲)‏برای نمونه‌های بسیار ضخیم و یا چرکی

(‏a)‏رقیق کردن در یک قطره saline بر روی اسلاید برای آماده‌سازی اسمیر آسان‌تر.

(ب) به طور متناوب، نمونه را روی یک لام قرار دهید، آن را با لام دوم بپوشانید، لام ها را به هم فشار دهید و آنها را از هم جدا کنید مواد اضافی را در کنار اسلایدها با یک حوله کاغذی ضد عفونی شده بردارید.